依據(jù) SNT 1924-2011
1. 前處理(以豬肉為例)
準(zhǔn)確稱取5g(至0.01g)搗碎的豬肉,加入10ppm的沙丁胺醇、鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺的混標(biāo)10ul,1ppm的內(nèi)標(biāo)各100ul于50ml離心管中,加入20ml乙酸胺緩沖液,均質(zhì)提取1min,充分酶解,低溫8000r/min離心5min,收集上清液于離心管中,加入20ml正己烷,震蕩均勻,低溫12000r/min離心5min,棄去正己烷層,取水層,待凈化。
固相萃取小柱:
InertSep MPC 3ml/60mg或WondaSep MPC 3ml/60mg
SPE方法:
活化/平衡:3ml甲醇、3ml水、3ml 0.1mol/L 鹽酸溶液
上樣:上述提取液上柱,<1ml/min
清洗:3ml 0.1mol/L 鹽酸溶液、3ml 水、3ml 50%甲醇、3ml正己烷
小柱抽負(fù)壓干燥
洗脫:3ml洗脫液(乙酸乙酯:甲醇:氨水=55:45:5)
將洗脫液氮吹至干,加入1ml50%甲醇-水溶解殘?jiān)?.2um濾膜過(guò)濾,待測(cè)。
2. 色譜分析
色譜柱:InertSustain C18 3um 2.1*150mm
流動(dòng)相:A:0.1%甲酸水溶液 B:乙腈
梯度:
time | A% | B% |
0 | 95 | 5 |
10 | 5 | 95 |
12 | 5 | 95 |
流速:0.3ml/min
柱溫:25℃
進(jìn)樣量:1ul
儀器:UPLC +QTOF-MS
3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
名稱 | 基質(zhì)加標(biāo) | |
相對(duì)回收率 | 回收率RSD | |
沙丁胺醇 | 84.6% | 6.15% |
萊克多巴胺 | 84.2% | 7.32% |
克倫特羅 | 96.6% | 2.69% |
代表圖譜
4. 結(jié)論
采用InertSep MPC 3ml/60mg 或WondaSep MPC 3ml/60mg,對(duì)豬肉中三種瘦肉精克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺進(jìn)行加標(biāo)回收率考察,相對(duì)回收率均在80%--100%之間。
產(chǎn)品分類
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